COLLYRES AU SÉRUM AUTOLOGUE – APPROCHE DE L’IMPACT DES FILTRATIONS SUR LA CONCENTRATION EN MOLÉCULES ACTIVES : ÉTUDES PRÉLIMINAIRES
Réf. 021 PT
Edouard BERNIKIER1, Pauline MONCASSIN1, Margot COLIN 1, Edouard LEFEBVRE1, Lucille CHAMPMARTIN1, Pierre-antoine FAYE 2, Damien LANNOY 3, Maxime ROCHER4, Voa RATSIMBAZAFY5
1 : Service de Pharmacie , CHU Limoges, 2 Av. Martin Luther King, 87000 Limoges, France
2 : Service de Biochimie et Génétique Moléculaire, CHU Limoges, NeurIT, UR20218, Institut GEIST, Faculté de Médecine, 87000 Limoges, France
3 : Service de Pharmacie, CHU Lille , ULR GRITA, Université Lille , 59000 Lille, France
4 : Service d´Ophtalmologie, CHU de Limoges , INSERM, RESINFIT, U1092 Université de Limoges, 87000 Limoges, France
5 : Unité des Préparations Galéniques, PUI, CHU de Limoges, INSERM U1094, IRD U270, Université Limoges, CHU Limoges, EpiMaCT, IENT, OmegaHealth , 87000 Limoges, France
2 : Service de Biochimie et Génétique Moléculaire, CHU Limoges, NeurIT, UR20218, Institut GEIST, Faculté de Médecine, 87000 Limoges, France
3 : Service de Pharmacie, CHU Lille , ULR GRITA, Université Lille , 59000 Lille, France
4 : Service d´Ophtalmologie, CHU de Limoges , INSERM, RESINFIT, U1092 Université de Limoges, 87000 Limoges, France
5 : Unité des Préparations Galéniques, PUI, CHU de Limoges, INSERM U1094, IRD U270, Université Limoges, CHU Limoges, EpiMaCT, IENT, OmegaHealth , 87000 Limoges, France
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Résumé du poster
Introduction : Les collyres au sérum autologue (CSA) sont des préparations pharmaceutiques utilisées dans le syndrome de l’œil sec chronique réfractaire. Leur utilisation, rapportée de 1975 à ce jour, montre le potentiel que les ophtalmologistes leur prêtent dans ce domaine. Toutefois, leur intérêt thérapeutique n’a pu être démontré de manière formelle, probablement, au moins en partie, par manque de procédé de fabrication standardisé. La stérilité est une spécification des collyres, avec l’autoclavage comme méthode de référence. Pour les produits thermosensibles (cas des CSA) la filtration est une alternative. En France, une recherche de consensus par méthode Delphi, pour standardiser le protocole de préparation des CSA, a obtenu un accord, pour recourir à la filtration stérilisante, de 91% (seuil de consensus fixé à 80%). Cependant, parmi les substances supposées actives figurent des cytokines, polypeptides ou protéines, pouvant remettre en cause la méthode de filtration. L’objectif de ce travail était de construire un plan d’expérience, pour approcher l’impact de la filtration stérilisante sur la concentration en molécules actives (MA) des CSA.
Matériels & méthode : Etude de la littérature utilisant la base de données PubMed avec la requête "Autologous serum eye drops", à la recherche des MA, de leurs caractéristiques (notamment la masse moléculaire, MM) et leur dosage, des pratiques vis-à-vis de la filtration et des résultats de ces dernières sur la concentration en MA des CSA.
Résultats & discussion : 299 références ont été extraites de la littérature (19/5/2023) dont 189 retenues sur titre puis, 57 retenues sur résumé. Les molécules les plus fréquemment citées comme étant des MA étaient : EGF (MM = 185 kDa), TGF-β1 (25 kDa), IGF-1 (7,6 kDa), Fibronectine (450 kDa) et Vitamine A (286,5 Da). Les 4 premières avaient été dosées par des méthodes ELISA et la Vitamine A, par HPLC. Sur 42 articles, issus de travaux étrangers, qui détaillaient le procédé de fabrication des CSA : 61,9% ne rapportaient aucune filtration ; 23,8%, une filtration stérilisante (FS) ; 4,8%, une clarifiante (FC), et 9,5% ne précisaient pas le type de filtration. Ils portaient principalement sur les aspects microbiologiques, et le peu d’articles qui abordaient l’impact de la filtration sur l’efficacité n’apportaient pas de réponses étayées.
Les dispositifs disponibles dans notre établissement (PALL Medical®) sont des filtres pour seringue (25 mm pour FS et 32 mm pour FC) en polyéthersulfone hydrophile.
Dans le cadre d’une étude préliminaire d’impact de ces filtrations, la meilleure candidate est donc une MA de MM intermédiaire.
Conclusion : Notre choix porte sur l’EGF. Pour le nombre de tubes et le volume de sérums à demander au centre de ressources biologiques de notre établissement, il sera tenu compte : 1. de la technique ELISA (préparation des échantillons, dosages proprement dits, nombre de puits du kit) et 2. des différents volumes engagés au niveau des filtres (volume de filtration recommandé, d’amorçage, volume de liquide retenu dans les dispositifs après purge d’air). Les sérums devront être exempts des virus suivants : VIH, VHC et VHB.
Mots clés : Collyre au serum autologue , Filtration d´un collyre, Molécule active, Epidermal Growth Factor EGF, Impact d´une filtration
Matériels & méthode : Etude de la littérature utilisant la base de données PubMed avec la requête "Autologous serum eye drops", à la recherche des MA, de leurs caractéristiques (notamment la masse moléculaire, MM) et leur dosage, des pratiques vis-à-vis de la filtration et des résultats de ces dernières sur la concentration en MA des CSA.
Résultats & discussion : 299 références ont été extraites de la littérature (19/5/2023) dont 189 retenues sur titre puis, 57 retenues sur résumé. Les molécules les plus fréquemment citées comme étant des MA étaient : EGF (MM = 185 kDa), TGF-β1 (25 kDa), IGF-1 (7,6 kDa), Fibronectine (450 kDa) et Vitamine A (286,5 Da). Les 4 premières avaient été dosées par des méthodes ELISA et la Vitamine A, par HPLC. Sur 42 articles, issus de travaux étrangers, qui détaillaient le procédé de fabrication des CSA : 61,9% ne rapportaient aucune filtration ; 23,8%, une filtration stérilisante (FS) ; 4,8%, une clarifiante (FC), et 9,5% ne précisaient pas le type de filtration. Ils portaient principalement sur les aspects microbiologiques, et le peu d’articles qui abordaient l’impact de la filtration sur l’efficacité n’apportaient pas de réponses étayées.
Les dispositifs disponibles dans notre établissement (PALL Medical®) sont des filtres pour seringue (25 mm pour FS et 32 mm pour FC) en polyéthersulfone hydrophile.
Dans le cadre d’une étude préliminaire d’impact de ces filtrations, la meilleure candidate est donc une MA de MM intermédiaire.
Conclusion : Notre choix porte sur l’EGF. Pour le nombre de tubes et le volume de sérums à demander au centre de ressources biologiques de notre établissement, il sera tenu compte : 1. de la technique ELISA (préparation des échantillons, dosages proprement dits, nombre de puits du kit) et 2. des différents volumes engagés au niveau des filtres (volume de filtration recommandé, d’amorçage, volume de liquide retenu dans les dispositifs après purge d’air). Les sérums devront être exempts des virus suivants : VIH, VHC et VHB.
Mots clés : Collyre au serum autologue , Filtration d´un collyre, Molécule active, Epidermal Growth Factor EGF, Impact d´une filtration